Whatman玻璃纖維濾膜的電滲作用雖高但很均一,不影響樣品的分離效果,由于醋酸纖維素薄膜吸 水量較低,因此必需在密閉的容器中進行電泳,并使用較低有電流避免蒸發(fā)。
Whatman玻璃纖維濾膜特點
(1)Whatman玻璃纖維濾膜對蛋白質(zhì)樣品吸附極少,無“拖尾”現(xiàn)象,染色后背景能*脫色,各種蛋白質(zhì)染色帶分離清晰,因而提高了測定的性。
(2)快速省時。由于Whatman玻璃纖維濾膜親水性較濾紙小,薄膜中所容納的緩沖液也較少,電滲作用小,電泳時大部分電流是由樣品傳導(dǎo)的,所以分離速度快,電泳時間短,加上染色,脫色。
(3)靈敏度高,樣品用量少。臨床醫(yī)學檢驗利用這一點,檢測在病理情況下微量異常蛋白的改變。
(4)應(yīng)用面廣。某些蛋白在紙上電泳不易分離,如胎兒甲種球蛋白,*,胰島素,組蛋白等用Whatman玻璃纖維濾膜電泳能較好地分離。
(5)電泳染色后,經(jīng)冰乙酸,乙醇混合液或其它溶液浸泡后可制成透明的干板,有利于掃描定量及長期保存。
Whatman玻璃纖維濾膜電泳已經(jīng)廣泛用于血清蛋白,血紅蛋白,球蛋白,脂蛋白,糖蛋 白,甲胎蛋白,類固醇及同工酶等的分離分析中,盡管它的分辨力比聚丙酰胺凝膠電 泳低,但它具有簡單,快速等優(yōu)點。
根據(jù)樣品理化性質(zhì),從提高電泳速度和分辨力出 發(fā)選擇緩沖液的種類,pH和離子強度。選擇好的緩沖液是揮發(fā)性強,對顯色或紫。